펩타이드 정제 대한민국

특정 아미노산 서열을 가진 펩타이드를 얻기 위해 Fmoc-SPPS(고체상 펩타이드 합성) 방법을 사용합니다.

배경:

펩티드는 생물학적 유기체의 다양한 세포 기능과 관련된 생리 활성 물질입니다. 이들의 분자 구조는 아미노산과 단백질 사이에 있으며 특정 순서로 배열되고 펩타이드 결합(-NH-CO-)으로 연결된 여러 아미노산으로 구성됩니다. 두 개의 아미노산 분자가 탈수 축합되어 형성된 화합물을 디펩티드라고 하며, 마찬가지로 트리펩티드, 테트라펩티드, 펜타펩티드 등에서 노나펩티드까지 있습니다. 일반적으로 탈수 축합을 통해 10~100개의 아미노산 분자로 만들어진 화합물을 폴리펩티드라고 합니다.

펩타이드 맞춤 서비스는 특정 요구사항을 충족하기 위해 서열, 순도, 분자량, 염분 함량 등 고객 요구 사항을 기반으로 펩타이드를 합성하는 것을 말합니다. 질량 분석법으로 분자량을 확인하여 조 MS의 정확성을 확인한 후 고성능 액체 크로마토그래피 시스템을 사용하여 정제한 후 농축하고 동결건조하여 미세한 펩타이드 분말을 얻습니다.

특정 아미노산 서열을 가진 펩타이드를 얻기 위해 Fmoc-SPPS(고체상 펩타이드 합성) 방법을 사용합니다. 고상 합성 중에 카르복실기와 반응할 수 있는 그룹이 고상 담체에 도입되어 아미노 보호된 아미노와 반응하여 첫 번째 아미노산을 수지에 고정시킵니다. 그런 다음 반응은 C-말단에서 N-말단까지 완료되어 표적 펩타이드 서열 합성이 완료됩니다.

정화 방법:

당사는 다음 단계에 따라 분리 및 정제를 위해 역방향 C18 준비 컬럼을 갖춘 고성능 액체 크로마토그래피 시스템을 활용합니다.

신분증:질량 분석을 위해 소량의 원유 펩타이드를 섭취하여 표적 펩타이드의 존재를 확인합니다(예인 경우 분석 크로마토그래피를 통해 C18 컬럼의 유지 시간을 확인하고, 그렇지 않은 경우 조 펩타이드를 재합성합니다).

용해:일반적으로 90% 물 + 10% 아세토니트릴(메탄올 또는 이소프로판올)을 선택하여 용해를 위해 초음파 보조를 사용합니다. 용해가 어려운 경우 서열에 염기성 아미노산 비율이 높을 경우 적절한 아세트산 또는 트리플루오로아세트산을 첨가하여 용해를 돕습니다. 산성 아미노산이 우세한 경우 적절한 암모니아수를 첨가하십시오. 소수성 아미노산이 우세한 경우 DMSO(디메틸 설폭사이드)를 사용하십시오.

여과법:나중에 사용하기 위해 (준비 컬럼을 보호하기 위해) 0.45 μm 필터 멤브레인을 통해 용해된 원유 생성물을 필터링합니다.

샘플 로딩:고성능 액체 준비 시스템을 사용하여 액체 샘플을 준비 컬럼에 입력합니다.

용출:1) 단계에서 결정된 용출 구배를 기반으로 다양한 길이의 펩타이드의 극성 차이를 사용하여 펩타이드에서 불순물을 분리합니다.

고성능 액체 크로마토그래피 시스템 사용의 장점:

다른 크로마토그래피 방법보다 분해능이 더 높습니다. 사용된 C18 준비 컬럼은 컬럼 효율이 높고 사용 수명이 길며 재현성이 뛰어나 반복 사용이 가능합니다. 빠른 속도와 높은 효율성, 각 샘플은 몇 분 또는 수십 분 내에 정제됩니다. 다양한 유형의 유기 화합물에 대해 우수한 선택성을 제공하는 역상 크로마토그래피의 광범위한 적용 및 성숙한 기술.

조악한 펩티드 정제 및 동결건조:

조 펩타이드는 고성능 액체 크로마토그래피 준비 시스템을 사용하여 분리 및 정제되고 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 사용하여 순도를 분석하여 적격 액체 성분을 얻습니다.

회전 증발 시스템: 자격을 갖춘 액체 성분을 진공 가열하여 쉽게 휘발성이 있는 유기 용매를 제거하고 최종적으로 목표 펩타이드가 포함된 용액을 얻은 다음 냉동고에 넣어 고체 얼음 결정을 형성합니다.

동결 건조 시스템: 고체 얼음 결정을 담은 용기를 동결 건조기 트레이 또는 진공 포트에 놓습니다. 진공 환경에서 펩타이드 제품은 승화되어 궁극적으로 고체 펩타이드 분말을 생성합니다.

펩타이드 결정은 동결 건조기에서 동결 건조할 준비가 되었습니다.